给大家推荐一篇发表在JACS上的文章，High-Throughput Covalent Modifier Screening with Acoustic Ejection Mass Spectrometry。文章的通讯作者是来自Merck公司的Xiujuan Wen博士和来自SCIEX公司的Chang Liu博士。
靶向共价方法具有解决“不可成药”浅结合位点和优化具有挑战性的蛋白靶标(如KRAS)的药物设计的潜力。高通量筛选目标蛋白的共价配体对共价药物开发具有重要意义。液相色谱(LC)耦合电喷雾电离质谱(ESI-MS)鉴定一直是共价药物发现的首选方法，但耗时的色谱分离(每个样品4 - 5分钟)限制了分析通量和文库大小。而MALDI结合飞行时间质谱方法则主要应用于单电荷离子表征中，很难对大分子量蛋白上的小分子修饰进行指认。本文作者利用高分辨声喷射质谱(HR-AEMS)，实现了对目标蛋白共价配体的高通量筛选。该技术采用声学液滴喷射模块，以非接触方式将纳升级样品从384或1536孔板喷射到开口接口中用于后续质谱分析。利用该技术不需要复杂后处理就可以进行质谱表征，通过识别未修饰蛋白和修饰蛋白间的分子量差异对共价化合物的标记能力进行区分，从而能快速进行化合物对目标蛋白共价标记能力的筛选，每个化合物用时在1s左右。基于此技术，作者针对 Werner 综合征解旋酶(WRN)进行了快速筛选，从10000余个化合物中筛选到了207个化合物可以对该酶进行有效的共价修饰。随后通过LC-MS和酶活分析对筛到的化合物进行了验证。该方法鉴定到的化合物酶活实验阳性率在75%，与LC-MS系统相比其假阳性或假阴性风险均较低。综上，本文利用高分辨声喷射质谱建立了针对WRN蛋白的共价配体快速筛选方法，与传统LC-MS方法相比大幅度提高了鉴定通量并维持了较高的鉴定准确性。原文链接：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.4c02377文章引用：DOI：10.1021/jacs.4c02377
